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采用酶切连接和重叠PCR连接两种方法将抗黑色素瘤单链抗体基因和去除N端信号肽的金黄色葡萄球菌肠毒素A基因进行融合,并将融合基因克隆于pET28a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)。用NiNTA系统对表达产物进行分离、纯化。MTT法检测融合蛋白对黑色素瘤细胞的体外抑制率。结果表明6HisScFvSEA融合蛋白可在E.coli BL21(DE3)中稳定表达,表达量占菌体蛋白的30%,主要以包涵体的形式存在。融合蛋白可通过激活效应细胞对表达相关抗原的黑色素瘤细胞发挥抑制作用。… … 相似文献
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构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2 突变体 ,研究其在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的生物学活性。采用PCR法构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2 突变体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用 19L发酵罐高密度发酵抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2 突变体 ,采用亲和色谱和分子筛色谱法纯化表达产物 ,并用SDS-PAGE和薄层激光扫描鉴定纯化产物 ;采用活细胞间接免疫荧光法测定纯化产物与靶细胞的结合活性 ;MTT法测定纯化产物对Raji细胞的生长抑制作用 ,并研究其作用机理。DNA序列测定结果表明 ,抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2 突变体已成功构建 ,表达可溶性产物的产量达 360mg L ,具有与Raji细胞 (CD20+)结合的活性 ,并抑制Raji细胞的生长 ,其作用机理为诱导Raji细胞凋亡。此突变体有望成为治疗非何杰金氏B细胞淋巴瘤的药物。… … 相似文献
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为从荒漠地衣共生菌中筛选耐旱基因,以分离自荒漠地衣糙聚盘衣Glypholecia scabra的共生菌为实验材料,研究了在水分胁迫条件下其耐旱生物学特性的变化情况。结果显示:在低水分活度条件下,糙聚盘衣共生菌通过积累可溶性糖含量维持细胞渗透压,通过增加抗氧化物质多酚及还原型谷胱甘… … 相似文献
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-鹅膏毒(环)肽和二羟鬼笔毒(环)肽是剧毒的鹅膏菌和其它几种致死毒菌中由一些修饰氨基酸组成的环肽毒素。由于-鹅膏毒肽对真核生物的mRNA合成的专一性抑制和和二羟鬼笔毒肽对肌动蛋白的专一性束缚,因而它们在分子生物学和细胞学研究中具有重要应用,对其需求逐步增加。为此,作者使用了一种改… … 相似文献
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总被引:5,自引:0,他引:5
<正>尖顶羊肚菌是一种珍贵、稀有的食药用真菌。研究表明,尖顶羊肚菌具有增强肌体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抗氧化、抑制肿瘤等作用(Elmastas et al.2006;孙晓明等2001;余群力1997)。然而关 相似文献
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The ultrastructure of conidia produced by the mycelia of Polyporus umbellatus was studied by use of scanning and transmission electron micro… … 相似文献
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