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  相似文献

编辑部 《微生物学通报》2013,40(5)

腺相关病毒载体工程毒株精细化纯化

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[背景] 大量制备高纯度的重组腺相关病毒（Recombinant Adeno-Associated Virus,rAAV）,是以腺相关病毒（AAV）为投递载体的基因靶向治疗或基因工程药物研发过程中需要解决的重要问题。[目的] 利用层析柱法大量纯化质粒和rAAV细胞培养液,以获得高纯度的rAAV颗粒。[方法] 对组装rAAV的3种质粒用HiPrep^TM10 Sepharose 6FF和HiTrap PlasmidSelect Xtra凝胶层析柱纯化,目的是得到组装AAV的超螺旋质粒DNA,然后对组装rAAV过程中的AAV-293细胞培养方法进行优化,组装成功病毒后,再对收集到的细胞提取液用HiLoad^TM10Q和HiLoad^TM10SP阴阳离子交换层析柱纯化,最后用纯化浓缩后的rAAV感染HT1080细胞,通过流式细胞仪检测荧光表达细胞数,计算浓缩后活病毒感染滴度。[结果] HiPrep和HiTrap层析柱纯化后得到大量高纯度的超螺旋质粒DNA,组装病毒后,用HiLoad柱纯化获得大量高纯度的rAAV颗粒,通过测定,rAAV基因组滴度达到（2.46±0.37）×10¹² TCID₅₀/mL （MOI=1.0×10⁴）。[结论] 通过一系列精细化组装纯化制备出高纯度、高滴度rAAV病毒颗粒。… …   相似文献

高强  宁毅  熊涛  胡珏  聂娟  李玲  肖荣 《微生物学通报》2021,48(11):4468-4476

褐飞虱共生解脂假丝酵母抗吡虫啉菌株的驯化

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为进一步研究共生菌在褐飞虱对吡虫啉产生抗性中的生理生化机制,在稻田杀虫剂对褐飞虱共生解脂假丝酵母生长影响的基础上,选用不同吡虫啉浓度进行抗药性菌株的驯化。结果表明,褐飞虱共生解脂假丝酵母在不同吡虫啉浓度(2 000、1 000和500 mg/L)的固体培养基上继代培养,经过20代… …   相似文献

李娜  陈建明  张珏锋  何月平  陈列忠 《微生物学通报》2011,38(2):237-241

氰戊菊酯降解菌FDB的分离鉴定及其生长特性

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从长期受农药污染的农田土壤中分离筛选到一株降解氰戊菊酯杀虫剂的细菌菌株FDB。经形态和生理生化特征鉴定以及对16SrDNA序列进行同源性比较,将该菌株鉴定为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa。FDB能以氰戊菊酯杀虫剂为唯一碳源生长,在30°C培养5d对100… …   相似文献

汤鸣强  田盼  尤民生 《微生物学通报》2010,37(5):0682-0688

萝卜叶绿体DNA花粉育性特异片段的定位

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本实验采用萝卜细胞质雄性不育系401A及其同核保持系401B为材料,利用BamH I、EcoR I、BglI和HindⅡ四种内切酶酶解其叶绿体：DNA。除HindⅡ外,其余三种内切酶电泳图谱中均显示两系之间的明显差异。将BamH I的5个差异片段分别与载体pBR322进行体外连接… …   相似文献

王虹李继耕  孔繁瑞 《生物工程学报》1989,5(1):40-45

小核菌中dsRN 的存在、位置及其生防作用

  

ScleortiumcepivorumBerk.是引起洋葱白腐病的病原真菌,大部分测试的菌株含有dsRNA片段,这些dsRNA片段被称为真菌病毒。经琼脂糖凝胶电泳分析,在不同分离株之间或同一分离株不同提取物之间dsRNA带的数量和位置有很大的变化。ScQ-4菌株菌丝生长缓慢,致病… …   相似文献

陈立红  BOLAND  Grey  J.  闫伟 《菌物学报》2005,24(3)

医学微生物学讨论式教学的意义

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医学微生物学是医学基础课,为了提高教学质量,通过讨论式的微生物学教学方式,启发培养学生的多向思维能力、创新能力和开拓精神,拉近学生与现代生命科学发展的距离,使微生物学课程的学习成为对微生物学探索的开始,采用讨论微生物学新进展的教学方式,探索最合适的培养高素质人才的有效途径。… …   相似文献

刘新  张博芬  周园  董为   《微生物学通报》2005,32(6):133-135

杉木上舟皮盘菌属一新种

  

本文报道在安徽省岳西县发现的舟皮盘菌属(Ploioderma Darker)一新种,即毁坏舟皮盘菌(P.destruens Y.R.Lin et Hou P.nov.)。该种以子囊具长柄,侧丝顶端显著膨大以及产生分生孢子果和线纹等特征,区别于近似种P.handelii(Petra… …   相似文献

林英任  侯成林 《菌物学报》1995,14(3)

大肠杆菌感受态细胞培养与冻存条件的研究

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测定大肠杆菌JM107在37℃培养条件下的生长曲线,制备其对数生长期不同阶段感受态冻存细胞,并对冻存细胞的转化率进行研究。结果显示：分离良好的单个新鲜菌落接种于50mlSOB培养基,经37℃,170～180r/min振荡培养210min左右,所得冻存细胞转化率最高,－7O℃保存时可达5．2×10⁷转化子／μgDNA且感受态保持时间长,即使存放两个月仍能保持相当高的转化率。－20℃保存时也能在三周内保持较高转化率。… …   相似文献

万波  郑莉  程书秋   《微生物学通报》1997,24(4):234-236

hNOK抗体的制备及肺癌组织中NOK的表达检测

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Novel Oncogene with Kinase-domain (NOK)是一个新的肿瘤相关基因, 其结构上?与受体蛋白相似, 具有一个蛋白激酶结构域。过量表达NOK会导致肿瘤的产生与转移。为了更进一步研究生理状态下NOK的功能, 需要制备NOK特异性的抗体。利用GST融合蛋… …   相似文献

徐方  李颖华  王银银  任芳丽  刘力  常智杰 《生物工程学报》2008,24(3):480-484

井冈山地区叶杯菌属两个新种

  

从江西省井冈山地区采集到的叶杯菌属（Ciborinia）两个新种──半球叶杯菌（Ciboriniahendsphaerica）和井冈山叶杯菌（Ciboriniajinggangensis）,讨论了新种与相近种之间的形态学差异。新种的发现使中国已知叶杯菌属的种数明显增加。… …   相似文献

庄文颖  王征 《菌物学报》1997,16(3)

红海榄根际土壤来源的青霉属真菌XGH2321及其抑菌活性

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本研究根据形态学和ITS序列分析结果,将一株分离自海南东寨港红树林保护区红海榄根际土壤的菌株XGH2321鉴定为青霉属的一种真菌.通过对培养基中的碳源、氮源和盐度的优化,确定了适合该真菌菌株分泌抑菌活性物质的改良查氏培养基(4%玉米浆,0.3%NaNO3,0.05%KC1,0.1… …   相似文献

许婷婷  吴垠  贾阳阳  刘冰  叶波平 《微生物学通报》2009,36(11):1682-1687

双层面调控S. cerevisiae碳流促进L-乳酸积累

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摘要：【目的】调控Sacchromyces cerevisiae丙酮酸节点碳流分布促进L-乳酸积累。【方法】利用同源重组方法,将来源于Bovine的乳酸脱氢酶基因LDH整合到S. cerevisiae CEN.PK2-1C基因组中,同时敲除丙酮酸脱羧酶基因PDC1,将碳流导向L-… …   相似文献

赵亮亮  汪军  周景文  刘立明  堵国成  陈坚 《微生物学报》2011,51(1):50-58

霍乱弧菌毒素(CT)基因探针的制备及应用

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用氯化铯-溴化乙锭密度梯度超离心法,分离纯化包含CT基因的重组质粒pCT 332,以限制性核酸内切酶XbaⅠ+BgⅢ酶切,在琼脂糖凝胶电泳后,从凝胶中回收CT基因,然后用[α-³²P]dATP经DNA缺口翻译标记该基因。将CT基因探针与霍乱弧菌及其它细菌菌株杂交。试验指出,该探针与大肠杆菌C600,RR1和包含质粒pBR 322或pBR 325的C600没有同源性;与痢疾杆菌和猪源、人源的ETEC杂交也呈阴性反应;当与Y-1肾上腺细胞和GM1酶联免疫吸附试验阳性的霍乱弧菌杂交时,呈阳… …   相似文献

徐永强  苏国富  刘传暄   《微生物学通报》1988,15(2)

植物乳杆菌荚膜缺陷型菌株的诱变选育

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以自主分离和鉴定的产荚膜多糖植物乳杆菌C88为出发菌株,采用亚硝基胍诱变、墨汁负染和显微镜观察筛选获得一株荚膜缺陷型突变株,命名为植物乳杆菌C88M3,经多次传代突变菌株具有良好的遗传稳定性。通过16SrDNA序列分析、菌株生长曲线和RAPD分析比较了野生型菌株和荚膜缺陷型菌株在… …   相似文献

周丹  曾宪鹏  李盛钰  赵玉娟  张雪  谢达平  杨贞耐 《微生物学通报》2010,37(11):1666-1671

香蕉枯萎病菌粗毒素对地衣芽胞杆菌生长和培养液上清蛋白组成的影响

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本文研究了香蕉枯萎病菌4号生理小种湛江菌株(Foc 4-zj)产生的粗毒素对地衣芽胞杆菌R21菌株生长及其培养液中蛋白组成变化的影响。实验结果表明, Foc 4-zj的粗毒素能够抑制R21菌株的生长, 缩短其生长周期; 减少培养液上清蛋白含量以及改变蛋白质的种类; 低剂量的粗毒素… …   相似文献

黎永坚  杨紫红  陈远凤  陈燕红  程萍  喻国辉 《微生物学通报》2009,36(12):1826-1831

二十碳五烯酸等多不饱和脂肪酸高产菌的筛选

  总被引：12，自引：0，他引：12

自从Dyerbers在1978年指出二十碳五烯酸（EPA）有益于人类健康以来,人们已发现二十碳五烯酸等N－3多不饱和脂肪酸具有预防和治疗动脉粥样硬化、血栓的形成和高血压,防癌抗癌,促进大脑发育,预防老年痴呆,保护视力等功能。目前其唯一商业来源为深海鱼油,但由于鱼油资源有限,且其中… …   相似文献

刘吉华袁生  戴传超 《菌物学报》2000,19(3):407-409

蛇毒类凝血酶calobin在毕赤酵母中的表达

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蛇毒类凝血酶是临床上防治血栓栓塞性疾病的有效药物。参照朝鲜蝮蛇(Agkistrodon caliginosus,Korean Viper)类凝血酶calobin基因序列(GenBank AccessionNo.U32937.1),将人工合成的calobin基因克隆到酵母表达载体p… …   相似文献

袁盛凌  王芃  陶好霞  展德文  王艳春  王令春  刘纯杰  张兆山 《生物工程学报》2009,25(4):526-532

金针菇漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究

  总被引：13，自引：0，他引：13

综合运用cDNA末端快速扩增 (RapidAmplificationofcDNAEnds ,RACE )和基因组步行等技术克隆到一个金针菇 (Flammulinavelutipes)的漆酶结构基因和其对应的全长cDNA ,经测序和BLAST比对分析表明该基因属于多铜氧化酶基因家族… …   相似文献

张银波 姜琼江木兰  马立新 《微生物学报》2004,44(6):775-779

超临界流体中酶催化的研究进展

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阐述了充当反应介质的超临界流体、固定化酶的载体以及反应温度和压力对超临界流体中酶催化反应的影响 ,并介绍了超临界流体中酶催化反应在工业上的应用现状和发展前景。  相似文献

刘森林  宗敏华   《微生物学通报》2001,28(1):81-85