白地霉Y162脂肪酶基因克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

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借助生物信息学,对已克隆的地霉属脂肪酶全长基因序列进行同源比对,根据保守序列设计引物,在基因组DNA和cDNA水平上,于国内首次克隆了Geotrichum candidum Y162脂肪酶基因。G.candidum Y162脂肪酶基因全长1692bp,不含内含子,编码包括19个氨… …   相似文献

阎金勇  杨江科  徐莉  闫云君 《微生物学报》2008,48(2):184-190

冰核细菌_{Erwinia ananas} 110冰核基因克隆和序列分析^*

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从作者自行分离的冰核细菌(Erwinia ananas 110)中克隆到我国第1个细菌冰核基因,并完成其序列测定和分析。所克隆基因编码区全长3921bp,编码1306aa,氨基酸序列明显分为3个区即N-端(161aa)、C-端(41aa)的单一序列区和中部的高度重复序列R区(1104aa),以16氨基酸为重复单元的R区占整个编码序列的84.5％。序列分析表明我们所克隆的基因为一个新冰核基因,将其命名为iceA,该基因已在GenBank上登录,登录号为:AF387802。… …   相似文献

唐朝荣  孙福在  赵廷昌  李瑞峰   《微生物学通报》2002,29(4)

代谢木糖产乙醇的酿酒酵母工程菌研究进展

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随着能源价格的持续上涨,使用木质纤维素生产燃料乙醇已具有重要的实践意义.木糖是多数木质纤维素水解产物中含量仅次于葡萄糖的一种单糖,传统乙醇生产菌株酿酒酵母不能利用木糖,这为使用以木质纤维素为原料发酵生产乙醇带来了困难.多年以来人们试图通过基因工程和细胞融合等方法对其进行改造使其能… …   相似文献

张金鑫  田沈  刘继开  张亚珍  杨秀山 《微生物学通报》2008,35(4):0572-0576

抗真菌肽LP-1的分离纯化及特性分析

  总被引：38，自引：2，他引：38

拮抗菌枯草芽孢杆菌(%Bacillus subtilis)%TG|26分泌产生的小肽经两次盐酸沉淀、丙酮分级沉淀和Hi|pore反相柱两次纯化,分离得到一种新的抗真菌的小肽,命名为LP|1。经MALDI|TOF质谱鉴定,分子 量为10573,等电聚焦测得其pI为475。LP|1对温度有较高的稳定性,100℃保温30min,仍能保持75%的活性。抑菌谱表明,该抗菌肽对瓜果腐霉%(Pythium aphanidermatum),玉蜀黍赤霉病菌(Gibberella zeae),长柄链格孢(Alternaria longipe)和番茄蔫萎座镰孢霉(Fusarium oxysporum %f.%lycopersici)等植物病原真菌有很强的抑制作用。LP1可造成绿色木霉(Trichoderma viride)%菌丝生长形态异常：菌丝端部膨大,菌丝扭曲,分支加剧,菌丝内细胞质分布不均匀,发生凝聚。茚三酮反应以及测序结果均证实其为环肽。… …   相似文献

刘颖徐庆  陈章良 《微生物学报》1999,39(5):441-447

青海高寒草甸土壤放线菌区系研究

  总被引：9，自引：1，他引：9

2001～2002年从海北高寒草甸生态系统采集土样,用不同方法从中分离放线菌300余株,根据其形态和分类特征,分别归入小单孢菌属(Micromonospora)、诺卡氏菌属(Nocardia)、糖多孢菌属(Saccharopolyspora)、原小单孢菌属(Promicromon… …   相似文献

王启兰曹广民  姜文波张耀生 《微生物学报》2004,44(6):733-736

人溶酶体酸性b-葡萄糖脑苷脂酶基因的克隆及其在COS7细胞中的表达

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从人胎盘组织提取总RNA, 采用RT-PCR扩增人溶酶体酸性b-葡萄糖脑苷脂酶(Lysosomal acid b-glucosidase, GlcCerase)基因编码区的全部序列, 并克隆到pMD-19T载体上, 构建克隆载体pMD-GlcCerase。经测序验证后, 将Glc… …   相似文献

张艳丽  许丹  王子玉  孟立  王锋 《生物工程学报》2009,25(2):263-267

抗CD5单链抗体基因克隆和表达

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以分泌抗CD5单克隆抗体的杂交瘤细胞poly(A) mRNA为模板,通过RTPCR扩增出抗CD5单克隆抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL) cDNA片段组装出抗CD5单链抗体(ScFv) cDNA片段。该ScFv片段被克隆到pCANTAB 5E载体上,以E.coli TG1为宿主,进行噬菌体表面呈现。通过Molt4细胞表面分子CD抗原,对噬菌体表面呈现的ScFv进行免疫亲和富集筛选。经细胞ELISA鉴定,得到4株高亲和力克隆。DNA序列分析得知,单链抗体全长732碱基,其中VH为339碱基,VL为300碱基。抗CD5 ScFv在E.coli HB2151中以可溶形式分泌表达,产物主要分布于周质之中,占周质中总蛋白的20%。… …   相似文献

王菲  马清钧 《生物工程学报》2001,17(2):131-134

草坪禾草丝核菌的核相研究

  总被引：3，自引：0，他引：3

2003～2005年从上海市、浙江省、山东省、河南省和陕西省草坪褐斑病的97份病株标本中,分离得到了73个丝核菌分离物,其寄主包括多年生黑麦草Lolium perenne、高羊茅Festuca arundinacea、草地早熟禾Poa pratensis、匍匐翦股颍Agrosti… …   相似文献

石仁才  商鸿生  张敬泽 《菌物学报》2007,26(2):221-225

内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶关键氨基酸位点的改造提高对烷基取代2-酮酸的催化活力

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【背景】高效实现D-氨基酸的生物合成一直是人们关注的热点。内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶(meso-diaminopimelate dehydrogenase,DAPDH)能够直接催化2-酮酸和氨合成D-氨基酸。【目的】提高DAPDH对烷基取代2-酮酸的催化活力,并解释其催化机制。【… …   相似文献

程新宽  陈曦  冯进辉  吴洽庆  朱敦明 《微生物学通报》2020,47(7):2119-2127

新生隐球菌Cap59缺陷株ura5突变株的筛选方法^*

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改进筛选新生隐球菌Cap59荚膜缺陷株ura5突变株的方法。采用硫酸二乙酯化学诱导新生隐球菌Cap59荚膜缺陷株 ,利用 5 氟乳清酸 (5 FOA)反筛选法筛选ura5尿嘧啶合成基因突变株。用新方法筛选到 2株Cap59荚膜缺陷株ura5突变株。建立了一种筛选新生隐球菌荚膜缺陷… …   相似文献

郭秀军  廖万清  任大明  王荫榆   《微生物学通报》2004,31(2)

以23S rDNA一个多变区作为分子标记对致病杆菌属细菌进行分类鉴定

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【目的】致病杆菌属(Xenorhabdus)细菌是一类重要的生物杀虫剂,斯氏属昆虫病原线虫的共生菌,建立快速准确的分类鉴定方法,对研究开发这类细菌至关重要。【方法】本研究PCR扩增测序了本室保藏的26株,含20种已定名致病杆菌属细菌的一段845 bp的23S rDNA序列,构建了… …   相似文献

赵景秀  柳春林  邱礼鸿  庞义 《微生物学报》2012,52(4):512-518

还原亚硒酸盐产生红色单质硒光合细菌菌株的筛选与鉴定

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从实验室保藏的光合细菌中筛选出一株对亚硒酸钠还原效率较高的菌株S3,其亚硒酸钠还原产物通过透射电子显微镜及EDX(Electron-Dispersive X-ray)分析确定为红色单质硒。菌株S3的形态学特征、生理生化特征及光合色素扫描结果与固氮红细菌(Rhodobacter a… …   相似文献

王东亮  肖敏  钱卫  韩波 《微生物学报》2007,47(1):44-47

RGD肽与尿激酶B链融合蛋白原核重组表达质粒的构建、表达和功能的初步分析

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将化学合成的RGD肽(Arg-Gly-Asp)编码寡核苷酸与尿激酶B链cDNA相连成为融合基因后,克隆至原核表达质粒pBV220中,在P-RP-L启动子的作用下,经42℃热诱导,在大肠杆菌DH5α中获得了融合基因的表达,其表达量占菌体总蛋白的9.2%,表达产物以无活性的包含体形式… …   相似文献

朱甫祥邢桂春  贺福初 《生物工程学报》2000,16(5)

ε-聚赖氨酸发酵过程污染微生物的分离与鉴定

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【目的】研究ε-聚赖氨酸发酵过程中污染微生物的种类。【方法】采用稀释涂布法、划线法、环境胁迫法和液体营养富集法等对污染样本进行微生物的分离与纯化,通过菌落形态和显微观察,再结合16S rRNA基因序列分析,确定分离菌株的系统发育地位,并对分离菌株的ε-聚赖氨酸耐受性进行考察。【结… …   相似文献

田波  陈旭升  任喜东  毛忠贵 《微生物学通报》2015,42(9):1631-1638

人胰岛素样生长因子－ⅡcDNA的PCR扩增及序列分析

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人胰岛素样生长因子(Human insulin-like growth factor,简称 h IGF)是一类既有细胞分化和增殖活性,又有胰岛素样作用的多肽,包括IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ两种。其中IGF-Ⅰ的功能比较清楚,而IGF-Ⅱ的作用正在研究中,可能在胎儿的生长发育及脑组织和… …   相似文献

吴雅旭石成华  张京生陈国凤 《生物工程学报》1995,11(2)

发酵法生产生物表面活性剂

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发酵法生产表面活性剂相对于化工法而言有着无可比拟的优势。综述了发酵法生产生物表面活性剂的微生物源、发酵机理、发酵条件和产物分离技术等方面的研究进展 ,并简要介绍了其工业应用前景。  相似文献

徐成勇  鲁时瑛  周莲  周东阳  诸葛健   《微生物学通报》2003,30(3):85-90

菌株F12-11-1-2的16S rDNA序列分析及其生理生化性质研究

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菌株F12-11-1-2是一株从中国东海浙江海域200m的海泥中分离得到的,具有抗稻瘟霉(Pyricularia oryzae)活性。通过对菌株的形态、培养特征、生理生化特征的研究以及16S rDNA序列分析,结果表明它是一株适应了海洋环境的芽孢杆菌属(Bacillus)的枯草芽… …   相似文献

刘小宇  许强芝  杨好  艾峰  焦炳华 《微生物学通报》2007,34(1):0036-0038

食品中沙门氏菌分子检测靶点的筛选与评价

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[目的]发掘新的沙门氏菌分子检测靶点,筛选检测性能优秀的引物.[方法]利用BLAST程序比较沙门氏菌属内基因组DNA序列的同源性以及沙门氏菌与非沙门氏菌基因组DNA序列之间的特异性,发掘出100多个检测沙门氏菌属的特异性片段,并从中随机挑选出15个片段作为候选靶点,一共设计了27… …   相似文献

向雪菲  刘斌  张利达  史贤明 《微生物学报》2008,48(7):941-946

海洋野生鱼酶解提取鱼油的工艺分析

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海洋野生鱼与养殖鱼比较, 其鱼油中含更多的二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）、脂溶性维生素等活性成分。为提高海洋野生鱼的利用价值, 以野生小带鱼为原料进行酶法提油工艺研究。分析了不同的温度, 时间, pH值等影响因素下的提取、萃取以及离心效果, 以响应面法确定了最佳… …   相似文献

钱俊青  单昱东  廖启元 《生物工程学报》2008,24(6):1022-1028

改造的马铃薯Y病毒复制酶基因介导高度抗病性

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提取马铃薯Y病毒中国分离株(PVY—c)的mRNA作为模板,随机六聚脱氧核苷酸和寡聚dT为引物合成了单链cDNA。通过聚合酶链式反应(PcR)获得了PVY—C的核内含体b(Nib)全长cDNA克隆。在对其进行全序列分析的基础上,构建了PVY—CNIb基因全长．5’端缺失381个碱… …   相似文献

项瑜杨兰英  彭学贤莽克强 《生物工程学报》1996,12(3):258-265