可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究

摘要:

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C600/PbvTRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白，优化发酵工艺，探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略：间歇流加、Dostat、pHstat，摸索了一种流加策略，即DOstatpHstat组合流加，有效的避免了发酵过程中，尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加，使TRAIL蛋白在高密度培养条件下，得到高效表达。菌体密度最终达到300g/L（WCW）以上，可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的4.2%,含量为1.1g/L。在整个发酵过程中，乙酸浓度接近于0，且未使用任何特殊手段，如纯氧、加压等，简化了发酵工艺，降低了发酵成本，为TRAIL的工业化生产创造了条件。

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