镰形扇头蜱两个组织蛋白酶L-样半胱氨酸蛋白酶新基因的克隆与序列分析

摘要:

蜱是动物常见的外寄生虫，并且传播多种人和动物的疾病，严重危害畜牧业发展和人类健康。为了寻找基因工程疫苗候选抗原基因，根据半胱氨酸蛋白酶的保守性氨基酸序列及镰形扇头蜱氨基酸密码子偏好设计引物，PCR扩增、测序并分析得到2个镰形扇头蜱的半胱氨酸蛋白酶基因片段cysA和cysB，再通过RACE的方法得到全长基因序列。cysA全长168bp，编码332个氨基酸；cysB全长1153bp，编码335个氨基酸。经过分析, CysA和CysB均与其他蜱种或物种的组织蛋白酶L样半胱氨酸蛋白酶有高度同源性，两者均含有半胱氨酸蛋白酶活性位点处的保守性氨基酸序列, 因此cysA, cysB均为镰形扇头蜱两个新的组织蛋白酶L-样半胱氨酸蛋白酶基因。RT-PCR分析表明，CysA和CysB在镰形扇头蜱的不同发育阶段表达情况不一。

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