MAGE-3 DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察

摘要:

通过RTPCR方法扩增MAGE-3 cDNA，以pcDNA3.1+为载体，构建重组表达质粒pcDNA3-1/MAGE-3。重组质粒用脂质体转染鼠B16细胞，经RT-PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中MAGE-3的表达。以100μg质粒剂量肌肉注射接种小鼠，间隔10天，共3次，以空载体和PBS为对照。结果，重组质粒免疫的小鼠，其脾淋巴细胞对MAGE-3阳性靶细胞的杀伤活性为51.08±7.41%，与空载体组（8.44±1.89%）及PBS组（5.76±1.75%）相比，差异有显著性（P<0.01），而对MAGE-3阴性靶细胞的杀伤活性分别为8.21±1.65%，7.68±1.56%和5.13±1.42%，其差异无显著性；MAGE-3 DNA疫苗组免疫血清1∶15稀释时能检测到抗MAGE-3抗体，脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平明显升高，外周血中CD4+、CD8+T细胞也提高，小鼠肿瘤的生长速度明显减慢，与对照组相比，差异显著（P<0.01）。说明MAGE-3重组质粒免疫小鼠可以诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答。

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