摘要:为进一步提高光滑球拟酵母发酵生产丙酮酸的水平，在途径分析的基础上提出了一种组成型降低丙酮酸脱酸酶、但增强乙酰辅酶A合成酶活性的育种策略。通过亚硝基胍诱变，获得1株乙酸需求型突变株CCTCC M202019，在外加乙酸的培养基中表现出高于出发株21%的丙酮酸生产能力和良好的遗传稳定性。检测突变株CCTCC M202019中丙酮酸代谢相关酶的活性发现：(1)丙酮酸脱羧酶活性降低了40%；(2)外加乙酸与否的条件下，乙酰辅酶A合成酶的活性分别提高了103.5%和57.4%；(3)添加乙酸和突变对丙酮酸羧化酶、丙酮酸脱氢酶系、乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性没有显著影响。在含有乙酸的培养基中突变株细胞干重比出 发株高21.7%，可能是因为乙酰辅酶A合成酶活性的提高，补充了因丙酮酸脱羧酶活性降低而引起的胞质乙酰辅酶A短缺。在7L罐中含有6g/L乙酸钠的培养基中发酵62h，丙酮酸产量达到68.7g/L，对葡萄糖的产率为0.651g/g。
