摘要:利用RT_PCR技术,以SVDV HK’70为材料,扩增出VP2基因抗原区。将目的基因的PCR扩增产物直接进行双酶切,然后将酶切产物与酶切后的表达载体pGEX 4T_1进行连接,转化BL21菌体并提质粒,经酶切、PCR鉴定为阳性的重组质粒命名为pGEX_VP2,并测序。测序结果表明,目的基因插入的位置、大小和读码框均正确,表达载体构建成功。将含有阳性质粒的BL21菌液经IPTG诱导后进行SDS_PAGE分析,出现预期的目的蛋白条带,此目的蛋白经Western blot检测确定其有免疫活性。