摘要:用PCR合成的黑曲霉(Aspergillus niger)酸性α淀粉酶(Acid αamylase)的cDNA,构建了由酵母醇脱氢酶(ADH1)启动子和终止子引导表达,酸性α淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母Yip型表达载体pWHY中,构成双基因表达分泌质粒pWAG。采用pWAG与酵母Yep型G418抗性表达质粒的共转化,将两个基因表达元件整合到酒精生产酵母菌株AS2.346的染色体rDNA序列中,获得同时表达胞外酸性α-淀粉酶和糖化酶的双功能酒精酵母工程菌。